百香果潜伏病毒发生澳大利亚栽培和野生种百香果
摘要
Pares, R. D., Gunn, L. V., Keskula, E. N., Martin, A. B., 和 Teakle, D. S. 1997.发生西蕃莲潜伏香石竹潜伏病毒的耕地和澳大利亚野生种百香果。植物病害。81:348-350。
一种病毒被发现在商业百香果(百香果)是广泛分布在新南威尔士和昆士兰的种植。的颗粒观察弯曲杆的意思651、12纳米尺寸。这些颗粒通常发生在细胞聚集,但从来没有用柱状内含体有关,是典型的百香果木质马铃薯Y病毒。粒子显示出很强的亲和力(通过免疫电镜)抗血清制备在西蕃莲潜伏香石竹潜伏病毒(PLV)从德国却越来越少,亲和力抗马铃薯病毒和来自美国的M和PLV。调查结果表明②已在澳大利亚百香果存在超过10年,是普遍的新南威尔士州和昆士兰的大多数商业品种。该病毒已被发现的两次野生百香果suberosa,一旦野生P.subpelta,一旦在野生苗毛竹附近种植毛竹感染。三病毒侵染百香果(百香果记录)澳大利亚:百香果木质马铃薯Y病毒(PWV;15,16)、黄瓜花叶病毒(CMV;5,8,16),和百香果弹状病毒(PRV;11)。混合感染CMV和PWV有关联百香果,提示坏死(PTN)在南北方海岸病威尔士(13)。PWV在最普遍的澳大利亚商业百香果品种也发生在野生百香果属(15)。在1985和1993,在监控病毒相关的百香果的植物PTN通过电子显微镜,我们看到有些病毒是较短的曲折比PWV的粒子,即,像一个病毒比A。只有一个病毒被报道在百香果自然发生的,即,百香果潜隐病毒(PLV)在P.犁头L. P. suberosa L.在德国(2)和在百香果×香,无菌混合P.兴山L.×P. cincinnata的大师,在美国(14)。在佛罗里达州,病毒已经传输实验到p毛竹F.毛竹,毛竹F. flavicarpa退行,P. foetida L.,和P.兴山,所有它引起的不显眼,叶面镶嵌系统。在德国,佛罗里达州,PLV颗粒稍棒的正常长度为650纳米(2)或651 nm(14),和病毒被机械地传递到苋色藜考斯特和雷恩。和藜Willd.,诱导局部褪绿斑,全身绿。系统感染藜细胞病理学研究详细(1)。作为PLV至今仅在德国和美国佛罗里达州,并没有报道中天然毛竹,我们研究的是PLV发生百香果百香果在等澳大利亚。材料与方法源抗血清。使用以下的抗血清:抗PLV(a.plv-g)C.潮湿(大学捐赠的萨尔州,萨尔布吕肯,德国);a.plv-f埃利奥特大学捐赠的佛罗里达州盖恩斯维尔);antipotato S病毒(a.pvs)和antipotato病毒M(a.pvm),美国式文化收集;和a.cmv和正常兔血清(NRS)在我们的实验室。免疫试验。样品制备的免疫电镜(IEM)的方法(12)。颗粒被困1000小时,1 / 4稀释的抗血清,然后用1 / 32稀释的15分钟装饰洗涤前抗血清用2%铵。网格然后在飞利浦em300检查电子显微镜。双抗体夹心酶联免疫吸附法(双抗体夹心酶联)所描述的进行了克拉克和亚当斯(3)用1µG纯化IgG的a.plv-g每毫升为共轭涂层的抗血清。吸光度的反应在immulon 2大板块进行阅读与titertek MS2酶标仪分光光度计。一处吸光度0.10或以上405被认为是积极的;控制值分别为0.03或更少。从电子测量颗粒IEM样品的显微照片。番茄花叶病毒的照片(ToMV)前、后分别取那些的病毒,作为校准标准。ToMV的长度取300纳米(6)。
与其他的血清学关系由计数carlaviruses粒子被困(10)通过a.plv-g,a.plv-f,.pvs,和NRS后4·四稀释度的采集时间病毒感染的SAP(100、10-1、10-2、10—3)用三的抗血清和正常血清,计数为平均超过10随机选择领域。颗粒装饰(9)评估使用a.plv-g,a.plv-f,a.pvs,a.pvm,a.cmv,和NRS。颗粒被装饰的抗血清浮动网格上的抗血清滴稀释1 / 16和1 / 15为32分钟。调查。1985、150果从新南威尔士州的样品进行了检查,电子显微镜,包括一些由IEM使用捕获与a.pvs。在1994和1995,宽百香果进行调查。在这项调查中,样品从254个植物中新南威尔士州北部和昆士兰进行PLV使用IEM和ELISA a.plv-g通常组了。对七个类似的植物进行了筛选②采用ELISA,然后植物阳性组分别进行了测试IEM。接种。接种了浸泡在1% K2HPO4感染组织含少量硅藻土作为磨料。由此产生的悬浮液擦到藜叶,立即用自来水冲洗水。电子显微镜。小碎片感染的百香果叶组织是固定的3%戊二醛(0.1 M二甲胂酸一夜之间,给定一个固定的缓冲区)在相同的缓冲区,2%锇酸后固定治疗2小时,整块2%铀染色醋酸,脱水,分级乙醇系列,然后用丙酮渗透,丙酮/ Spurr树脂,最后Spurr模具树脂。超薄切片用赖omu3切片机用钻石刀和沾满铀在透射型电子显微镜检查中醋酸和铅。结果识别。平均长度为89被困于毛竹颗粒为651纳米(平均值= 6.13)的标准误差把它的范围内才开展起来(7)。这个粒子捕获试验结果表现出较强的亲和力的抗血清对德国分离PLV(plvg),而a.pvs具有中等亲和力颗粒与a.plv-f和NRS有没有(表1)。颗粒与抗血清的装饰显示了类似的模式说明1 / 32稀释a.plv-g,a.pvs,a.plv-f,和NRS(图1A D)。唯一的重装饰是由a.plv-g,而产生适度的装饰a.pvs。佛罗里达抗血清,a.plv-f,给浓度在1 / 16光饰(图中没有显示)。薄片电子显微镜显示的细长颗粒,类似的报道②(1)。没有风车或柱状体的一个典型的病毒感染在同一细胞中发现。接种。C.藜接种试验的感染率很低,从许多反复尝试发展局部病灶只有一个植物褪绿和一个全身绿。病毒一样
gatively染色制剂新南威尔士百香果1993。调查结果1994和1995(表2)显示,多数商业嫁接毛竹:毛竹植株感染与PLV,而体育苗果:果很少被感染。每一个商业种植毛竹F.果至少有一个被感染的植物;通常所有的植物进行PLV阳性。随着毛竹F. flavicarpa,所有简历。巴拿马市苗木种植没有治疗感染毛竹F.毛竹自由行,而三的植物未命名的线,为几年来与感染的体育协会。毛竹F.食用感染了PLV。六温室种植的幼苗的后代②感染毛竹F. flavicarpa藤进行了测试,并没有病毒。在其他植物物种的情况下,大多数样品自由行(表2)。只有归化种P.柳珊瑚(2 / 18 subpeltata感染)和P.奥尔特加(22 / 1)含有病毒。讨论先前血清学的比较涉及PLV等carlaviruses研究(2,4,14)表明,德国分离的部分液体通气是PVS密切相关但那么PVM(效价相差五两倍稀释法)。当我们使用IEM到检查澳大利亚的关系病毒对这些病毒,我们发现了类似的模式。我们的分离与plv-g并逐步减少相关PVS,plv-f,下。基于粒子形态,血清学反应,宿主的研究,和细胞病理学,我们相信在新南威尔士和昆士兰百香果的病毒是PLV。病毒发生在澳大利亚东部的主要果产区并已提出至少10年。许多主要品种都生长在所有领域,它很可能是病毒的在接穗主要移动。这个论点似乎是加强了事实这样,即使在治疗感染区嫁接品种正在生长CV。巴拿马除了受感染植物从PLV显然是免费的。此外,在P. suberosa PLV发生,P.subpeltata,野生苗毛竹是低。感染率低苗表明病毒是一通过载体或传播,效率低下这些物种并没有被吸引。部分液体通气对生产的影响澳大利亚百香果是未知的。在澳大利亚,PLV总是感染百香果与PWV。通过类比PTN(13),混合感染的PWV和另一种病毒会导致一个在这百香果产量降低PWV孤单。