内生菌抗癌制剂
产紫杉醇内生真菌所产生的紫杉醇的细胞毒性作用是通过在M1D和PDB培养基上培养后,从培养基滤液中分离出来的,并通过在体外使用不同浓度的紫杉醇溶液对细胞作用,量化观察细胞凋亡情况来确定其针对细胞的毒副作用。国家细胞科学中心从印度浦那采购了人类癌症细胞系(HLK210、 H116、 Int407、 HL251 和 BT220),通过使用浓度范围为0.005μM到5μM之间的紫杉醇溶液处理癌细胞48小时,然后观察其形态变化。再使用 0.5 毫克/毫升的磷酸缓冲盐水 (PBS),对细胞DNA进行碘化丙啶染色15分钟。随后使用不同浓度的产紫杉醇内生真菌产物尝试性治疗微生物7(0975-6299 Vol.1/Issue-3/Jul-Sep. 2010 www.ipbs.net ),治疗结果则使用光学显微镜观察,观察其细胞形态。然后,将观察区域划分为5个不同的领域,并随即抽查至少500个细胞进行计数,计算出每个实验凋零细胞的百分比。其中,作为指定细胞的是指那些显示特定细胞凋零形态的,包括细胞体积收缩、 染色质浓缩和膜的存在形态特征与凋亡小体出现结合的等。细胞凋亡中的细胞凋亡数是通过使用以下公式计算的,细胞凋亡的百分比=凋亡细胞数/总个数×100。通过紫杉醇对肿瘤细胞的作用产生的凋亡小体数来测定产紫杉醇内生真菌产物的细胞毒性作用,另外,产紫杉醇内生真菌的产物的毒性作用也通过对不同的人类癌细胞系的作用来测定。它们在体外针对HLK210、 H116、 Int407、 HL251 和 BT220这些癌细胞系表现出强烈的细胞毒性。以前的报告显示,在体外,紫杉醇对癌细胞系HLK210、 H116、 Int407、 HL251 和 BT220有强烈的作用。
最近,人们运用紫杉醇针对人类癌细胞系(肺癌、肝癌和卵巢癌)进行了一个标准测试,与体外细胞毒性分析产生了类似作用。根据药用植物紫杉醇的作用,人们进一步对可以使用紫杉醇的各种癌细胞进行了测试,包括人类乳腺癌细胞BT220、人类结肠H116、人体肠Int407 人肺HL251、 人类白血病HLK210的凋亡检测。随后人们实验显示紫杉醇浓度从0.005 μM 到 0.05 μM,诱导凋亡的细胞数量增加。但又通过实验,进一步增加了紫杉醇浓度,从0.05 μM到0.5 μM,发现随着浓度增加的细胞凋亡数目仅略增,而从0.5 μM到5 μM,则通过癌细胞凋亡显著减少而细胞死亡数目显著增加。研究表明,对于一部分人,低中浓度下紫杉醇的疗效非常依赖于特定的细胞类型。也有报导显示,在低浓度情况下,细胞的凋亡作用和紫杉醇的疗效非常依赖于特定的细胞类型。这还支持了先前研究成果,低浓度紫杉醇在对待其它群体时可以通过抑制纺锤丝的形成来抑制细胞分裂。
结论:这边评论目的明确的提到了植物内生真菌所产生的产物紫杉醇的分离和鉴定。在审查中,我们有信心去估计它的光谱和色谱实验结果将贴近实际,与给定的事实吻合,真菌紫杉醇和标准紫杉醇可以得到相同的实验结果。它还表明产紫杉醇内生真菌的产量是极高的,可以把它作为一个潜在的物种并通过基因工程的方法获得高产菌株,以提高紫杉醇的产量。通过发现植物内生真菌的意义还表明了存在丰富的真菌资源来生产紫杉醇。上述涉及到的一些例子和产紫杉醇内生真菌存在的前提背景和生产原理将有助于在药物开发的程序中起到一定作用。这是一个罕见的探索,因而将会生产出昂贵的产品,例如,利用紫杉醇可以检测某些植物内生微生物的一些能力并借此生产一些药物。为了满足科研和临床的需要,除了通过红豆杉来获得紫杉醇外,迫切需要其它方法来获得更多紫杉醇。讨论就到这里。
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